书签 分享 收藏 举报 版权申诉 / 21
文档类型

DB21∕T 3378-2021 辽宁省松材线虫病检验鉴定技术规程(辽宁省)

  • 上传人:x****个人认证
  • 文档编号:4562352
  • 上传时间:2021-10-14
  • 格式:PDF
  • 页数:21
  • 大小:804.17KB
  • 《DB21∕T 3378-2021 辽宁省松材线虫病检验鉴定技术规程(辽宁省)》由会员分享,可在线阅读,更多相关《DB21∕T 3378-2021 辽宁省松材线虫病检验鉴定技术规程(辽宁省)(21页珍藏版)》请在万象文库上搜索。

    1、TCS 65. 020. 01 CCS B 16 DB21 辽r-!-, 丁-省山巳ET且,万标准DB21/T 3378-2021 辽宁省松材线虫病检验鉴定技术规程Technical regulation on quarantine for the pine wi1t disease in Liaoning province 2021 -01 -30发布2021 -03 -02实施辽宁省市场监督管理局发布DB21/T 3378-2021 目次前言. 1 范围. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .。

    2、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 2 规范性引用文件. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 3 术语和定义. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .。

    3、 . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 4 取样.2 5 形态学鉴定.2 7 样品监管.3 8 检验鉴定结果反馈及疫情上报.3 附录A(资料性)松材线虫形态特征.5 附录B(资料性)松材线虫病取样.6 附录c(资料性)常用的松材线虫分离方法.8 附录o(资料性)临时玻片制作和线虫快速培养. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 附录E(资料性)松材线虫与拟松材线虫形态特征的主要区别. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .。

    4、 . 11 附录F(规范性)松材线虫形态学检验鉴定记录表. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 附录G(资料性)分子生物学鉴定13 附录H(规范性)松材线虫分子生物学检验送检表. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16 附录I(规范性)松材线虫检验鉴定报告. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 。

    5、. . . . . . 17 DB21/T 3378-2021 目IJ1=1 本标准按照GB!T1. 1给出的规则编写。本标准由辽宁省林业和草原局提出并归口管理。本标准起草单位:辽宁省林业发展服务中心(辽宁省林业和草原有害生物防治检疫工作站)、辽宁省危险性林业有害生物防控重点实验室。本标准主要起草人:姜生伟、葛芳、崔雪、吴吴、杨庆寅、焦大志、秦一航、舒红、张佩洁、孙龙生、董蔚、肖艳、冯世强、孟照煌、享1日斌、张艳春、王敬17)(、李菊、柴晓东、郑雅楠、刘佩璇、陈海明、郑英明、刘佳、张霞、杜岳纯、裴明阳、雷鸣吉。本标准发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈,我们将及时答复并认真处理,根据实际情。

    6、况依法进行评估及复审。归口管理部门通讯地址:辽宁省林业和草原局(沈阳市和平区太原北街2号),联系电话:024-234489270 标准起草单位通讯地址:辽宁省林业发展服务中心(辽宁省林业和草原有害生物防治检疫工作站)(沈阳市和平区太原北街2号综合楼B-621),联系电话024-234479350II DB21/T 3378-2021 辽宁省松材线虫病检验鉴定技术规程1 范围本标准规定了松材线虫病取样、检验鉴定、样品监管、检验鉴定结果反馈及疫情上报的相关技术和流程。本标准适用于松材线虫寄主植物及其制品检验鉴定。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适。

    7、用于本文件:不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB!T 23476松材线虫病检疫技术规程GB!T 23478松材线虫普查监测技术规程GB!T 35342松材线虫分子检测鉴定技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准3. 1 松材线虫Bursaphe/enchusxy/oph/us CSteiner et Buhrer) Nickle 属于线虫门(Ne:latoda) ,侧尾腺纲(Secementea) ,滑刃目(Aphelenchida),滑刃总科(Aphelenchoidoidea) , l骨刃科(Aphelenchoidoidae),伞i骨亚科(Bursaphelenchinae) ,伞i骨刃。

    8、属(Bursaphelenchus) 0其形态特征参见附录Ao3. 2 松材线虫病由松材线虫寄生在松树体内引起松树迅速死亡的一种毁灭性忡太病害,又称松树萎焉病、松材线虫萎焉屑、松树枯萎病。3. 3 松木及其制品松科原木、锯材和用于承载、包装、铺垫、支撑、加固货物的木质材料。如电缆盘、光缆盘、木板箱、木托盘、垫木、枕木、衬木等。经人工合成或经加热、加压等深度加工的包装木质材料除外,如胶合板、纤维板等。3.4 DB21/T 3378-2021 检验鉴定对松科植物及其制品,通过形态学特征或分于省物学特性检验判定是否含有松材线虫的过程。3.5 样晶从表现出异常症状的松科植物或松木制品上边取的,用于松材线虫病检验鉴定的材料。4 样4.1 感病。

    9、松树现地取样方法适用于春秋季普查和日常监测中发现的异常松树。春季普查在4月-6月份,秋季普查在8月-11月份。具体取样方法参见附录B.2o4. 1. 1 感病松树典型症状感病松树在新发生林分内呈零星点状分布,多为林分中的优势木,后发展为以定居点为中心,随机向外扩散。远看松针颜色为褐色或亮红褐色,枯死枝条从树冠向下逐渐增多,针叶不脱落。4.1.2 感病松树病症表现时间当年染病的松树一般在8月下旬至11月上旬表现病症,越年死亡的一般在4月-6月表现病症。4. 2 松木及其制品取样方法直接观察豆豆借助锯、斧等工具检查松木及制品是否干枯:重量是否明显减轻:木质部是否有蓝变:松脂味是否消失:有无媒介昆虫危害、补充营养取食的痕迹,如侵入孔、监道。

    10、、蝠室等。取样对象、取样部位和数量参见附录B.3o5 形态学鉴定5. 1 分离采用贝尔曼漏斗法、浅盘法进行(参见附录C)。分离时间一般需要4h-12ho将分离液体收集到试管或者烧杯中,通过自然沉淀或使用离心机处理后得到线虫分离液。5.2 :竟检将盛有线虫分离液的培养皿置于解剖镜下观察,先确认有元钱虫。对有线虫的样品进行活体检验,观察它的一般形态结构,选出特征明显的成虫,用胶头吸管或移液检移至载玻片上热杀死并制作临时玻片,再根据形态特征予以鉴别。(参见附录D)5. 3 培养当分离的线虫为幼虫:g)Zll准、雄成虫数量极少时,可以采用疫木保温保湿或真菌活体培养法快速培养松材线虫。(参见附录D)5.4 形态特征2 DB21/T 3378-。

    11、2021 根据松材线虫的形态特征、松材线虫和拟松材线虫形态特征主要区别(参见附录E)进行鉴定,一般先观察线虫中的食道球形状、口针有无及口针的形状,再对其典型形态特征观察和测计后才能确定。5.5 检验记录检验鉴定结果填入松材线虫形态学检验鉴定记录表)(参见附录F)0 6 分子生物学鉴定常用的分子生物学鉴定方法有松材线虫PCR检测、松材线虫自动化分子检测和实时荧光PCR检测。(参见附录G)7 样品监管7. 1 样晶保存送检样品应及时做分离检测,分别保存,避免交叉污染。将样品装入塑料袋内,在袋上扎少量小孔(木段或圆盘可直接保存),保持样品湿润。标明样品信息(送检单位、样品编号、送检时间等)放入40C恒温箱,一般在1个月内完成分离检验。检验。

    12、鉴定的样品保存不少于6个月,以备复检。7. 2 分子生物学检验样品送检样品送检时有条件的要先经过初步镜检,镜检后出具初步检验鉴定报告和松材线虫形态学检验鉴定记录表,并填写松材线虫分子生物学检验送检表(附录H),报送省级检验鉴定机构登记检验。送检要有专人负责,保证样品送检安全,不能通过邮寄方式。7. 3 样品销毁分离检验后的样品要采用高压灭菌、焚烧、粉碎的方式及时销毁处理。8 检验鉴定结果反馈及疫情上报8. 1 检验鉴定结果反馈省级检验鉴定机构应当在收到送检样品10个工作日内出具检验鉴定报告报告样式参见附录J)并留档备查。8. 2 检验鉴定结果确认检验鉴定结果可能为新增松材线虫病疫区和疫点时,省级检验鉴定机构应当在检验鉴定后3个工作日。

    13、内,将结果报送至省林业和草原行政主管部门所属的防治检疫机构,由其组织相关检验鉴定机构进行二次确认,确认后反馈至送检单位。8. 3 检验鉴定备案省级检验鉴定机构每半年需将检验鉴定开展情况上报省林业和草原行政主管部门所属的防治检疫机构备案。市、县送检的检验鉴定记录、报告等档案要保存3年以上。3 DB21/T 3378-2021 8.4 疫情上报松材线虫病疫情一经确认,市、县林业和草原行政主管部门应在规定时间内同时报告上级林业和草原行政主管部门及当地人民政府。8.5 疫情信息发布国家和省级林业和草原行政主管部门按照有关规定发布疫情信息。4 附录A(资料性)松材线虫形态特征DB21/T 3378-2021 松材线虫的雌、雄虫都呈蠕虫形,虫体。

    14、细长。唇区高,给缩明显,前缘圆。口针细长,中食道球卵圆形,占体宽的2/3以上。雌虫阴门宽,上阴唇长,向下覆盖。尾部末端近圆柱形,尾端椭圆或尾尖突,尾尖突长111m左右,不超过2mo雄虫交合刺大,呈弓形,成对,交合刺末端膨大尖突。尾部末端尖,侧面向腹弯由呈爪状,端部包裹卵形交合伞。雌虫A.整体F.体前部G.阴门区H-J.尾部雄虫B.整体c.尾部D.尾端E.交合刺5 B. 1 取样工具附录B(资料性)松材线虫病取样电锯或于锯、砍刀或斧头、于摇钻、标签、塑封袋。B. 2 现地取样方法B. 2.1 取样对象优先抽取尚未完全枯死豆豆刚枯死的松树。可参照以下特征选择取样松树:DB21/T 3378-2021 (1)对发现的枯死、濒死松树首先排除。

    15、其它死亡原因(干旱、人畜破坏、森林火灾、冻害、水渍、其它病虫危害); (2)针叶呈现红褐色、黄褐色:(3)整株或部分枝条萎焉、枯死,但针叶下垂、不脱落;(4)树干部有媒介ffi虫的产卵刻槽或侵入孔:(5)树干部松脂渗出少或无松脂渗出。B. 2. 2 取样数量以小班为单位,表现有取样特征的松树在10株以下全部取样;10株以上的先抽取10株进行取样检验,如果检验有则不需要继续取样,如果没有要继续取样检验,直至全部取样检验为止。B. 2. 3 取样部位优先在表现症状明显的枝条上取样。对树干取样时,一般在树干下部(胸高部位)、中部(上、下部之间)、上部(主干与主侧技交界处)3个部位取样。对于仅部分枝条表现症状的,在其表现症状的枝条上取样。对。

    16、于树干内发现媒介昆虫踊的,优先在踊室周围取样。B.2.4 取样方法在取样部位剥净树皮,用砍刀或斧头直接砍取1Og-200g木片:或剥净树皮,用于摇钻从木质部表面至髓心钻取100g-200g木屑:或者将枯死松树伐倒,在取样部位分别截取2cm厚的困盘等。B.2.5 样品标记所取样品要及时贴上标签,标明样品编号、取样地点、林班、小班、树种、博龄、取样部位、取样时间和取样人等信息。B. 3 松木及其制品取样方法B. 3. 1 取样对象6 DB21/T 3378-2021 选择截面无松脂痕迹、密度明显减轻或木质部有蓝变现象及有天牛危害的监道、踊室的松木及其制品进行取样。B. 3. 2 取样部位和数量原木取样时在取样部位剥净树皮,直接砍取100。

    17、g-200g木片;或用于摇钻从木质音1日至髓,山钻取100g-200g木屑:或分别截取2cm厚的圆盘O松木制品进行取样时可直接砍取100g-200g木片;或直接带回部分松木制品OB. 3. 3 样品标记所取样品要及时贴上标签,标明样品编号、取样地点、松木制品名称、取样时间和取样人等信息。7 。1贝尔曼漏斗法附录c(资料性)常用的松材线虫分离方法DB21/T 3378-2021 贝尔曼漏斗法是分离线虫的经典方法之一。分离器由漏斗、橡皮管、止水夹、厚面巾纸组成。(图C.l) 在口径为lOcm-20cm的漏斗末端接一段10cm长橡皮管,在橡皮管后端用止水夹夹紧,在漏斗内铺两层大小适中的面巾纸。将样品去皮后劈成长约lcm-4cm,直径lcm。

    18、-3cm的细条或直接取木屑约10g置于漏斗中的面巾纸,用面巾纸包好,力口水至浸没样品。注入水后要注意使水充满漏斗和下面的橡皮管,橡皮管内不得有气泡,如果有气泡可以松开止水夹放出一些水,忡掉气泡。室温不低于200C,分离浸泡用的水温在200C-300C之间,线虫游离出一定数量后可镜检,一般需要到-12ho要轻轻打开止水夹,用培养皿或烧杯在橡皮管下接取分离液约lOml;或用离心沉淀管接取分离液5ml,自然沉淀30min或1500/min离心2minoC. 2 浅盘法浅盘分离器主要由浅盘和筛盘组成,其中口径略小的底部为网筛状,放在另一个浅盘里面。将两层湿纱布铺于筛盘上,把样品劈醉(或木屑)置于筛盘的纱布上,慢慢注入清水,没过样品。12h-。

    19、24h后,将下面浅盘的分离液收集到小烧杯中,自然沉淀30min或1500r/min离心2mino(国C勾图C.1 贝尔曼漏斗法装置图11 乳胶啊水夫;s 8 图C.2 浅盘法装置图DB21/ T 3378-2021 布监KAPhy盼HV7dldr川t龙在样nll9 D. 1 临时玻片制作D. 1. 1 杀死线虫附录D(资料性)临时玻片制作和线虫快速培养DB21/T 3378-2021 将线虫分离;夜取-商放在载玻片上,将载玻片在酒精灯火焰上来回移动5s-6s,力口热过度会破坏线虫体内器官!lG使其表皮熟化变白,影响观察。也可以将线虫分离液放在试管中,才巴试管放在600C-650C的水浴箱中2min-3min,即可杀死线虫。D. 1.。

    20、2 玻片制作在载玻片上滴一滴水,用挑针或吸管吸-南线虫悬i夜在载玻片上,用挑针将线虫轻轻按到水滴底部,以免盖盖玻片时线虫会随水流到盖玻片的边缘,影响观察。在盖盖玻片时,要从侧面慢放,尽量不产生气泡。D. 2 线虫快速培养D. 2.1 疫木保温保湿培养将样品锯成小段,置于烧杯中,加少量清水使木段下端浸在水中,木段上端用湿纱布覆盖,在260C_300C培养箱内培养3天,取杯中水液,可获得较多成虫。D. 2. 2 单异活体培养制备马铃薯-葡萄柑-f京脂(PDA)培养基平板。通常用于培养松材线虫的真菌为灰葡萄于抱包(B岛ot盯FY川川y咀仰tIcin阳7er陀e功):9或克盘多毛子抱包(伊p与)esstLLalot归is叩pp圳.),此外用。

    21、镰刀阳(Fusarimspp.)培养松材线虫效果亦佳。无菌条件下将盘多毛阳、镰刀J包或灰葡萄J包接种在PDA平板上,盘多毛子包或镰刀子包280C恒温培养4d-5d,灰葡萄阻挡恒温培养4-5天,待菌丝长满干板,培养完成后可长期置于40C冰箱冷藏备用O培养基放置室温后将线虫接到菌丝上,盘多毛币、镰刀抱在300C条件下保湿培养线虫,2天即可分离鉴定。灰葡萄抱在250C恒温培养线虫需要1d-3do 10 E. 1 松材线虫典型形态特征前体部特征雌虫尾部指形附录E(资料性)松材线虫与拟松材线虫形态特征的主要区别图E.1 松材线虫典型形态特征雄虫尾部弓形雌虫尾部主豆尾尖突E. 2 松材线虫与拟松材线虫形态特征的主要区别DB21/T 3378-2。

    22、021 雄虫尾部交合伞雌虫阴门拟松材线虫B.muctonatus(Mar丑iylt Enda)在形态学和生物学方面都与松材线虫相似,旦分布较松材线虫广泛,在松材线虫病的检验中常常可见,工者在形态上的主要区别在于:(表E.l)表E.1 松材线虫和拟松村线虫影态特征主要区另IJ类别松材线虫拟松材线虫雌虫尾部亚圆锥形末端钝圆,少数可见微小的尾圆锥形,末端育明显的尾尖突,长度在尖突,不超过2m,一般为lm3.5m-5m 雄虫尾部交合刺远端有盘状突,交合伞为卵形交合刺远端无盘状突,交合伞为近方形11 DB21/T 3378-2021 附录F(规范性)松材线虫形态学检验鉴定记录表表F.1 松材线虫形态学检验鉴定记录表检验单位:HH叫王土/口U|。

    23、样号|采样地点天牛栖居痕迹|线虫|松材线虫|检验日期|检验人注采样地点填写到小班。例如XX县XX镇(XX林场)XX林l)IXX小班。天牛栖居痕迹填与!有或主七钱虫填与有或尤松材线虫填写是或否。12 G. 1 松材线虫PCR检测G. 1. 1 线虫基因组DNA的提取附录G(资料性)分子生物学鉴定DB21/T 3378-2021 制作线虫裂解液(200mmollLT巾-HCl、200mmolILNaC1、1OOmmollLEDT A、2%SDS、2 %-mercaptoethano 1、200吨/mL蛋白酶旬,预冷线虫裂解液,按照、lOIlL线虫裂解液条线虫比例,将线虫与裂解液置于离心管中。置于PCR仪,700C条件下保温处理35min。

    24、,在950C条件下保温处理10min后,12000/min离心2min,取上清液。G. 1.2 反应体系每反应的混合液总体积为20IlL.其中:() 2.0L 10 x快速TaqPCR缓忡液:(2) 2L 2.5mmollL的dNTP;(3) 0.3L快速扩增Taq酶:(4) 1.51lL 10mmol/L的引物组合B;(5) 2.0L的模板DNA;(6)补充高压灭菌重蒸水至20LG. 1.3 反应程序反应混合液在980C预变性缸,进入循环980C变性35,520C退火35,720C延伸405,共30个循环,最后720C延伸2minoG. 1.4 结果检测PCR扩增产物在1.5%的琼脂糖凝胶上电泳,电泳缓冲液为lxTAE或lxTBE。

    25、,电压为5V/cm,电泳时间为30mino置j疑胶于302nm透射紫外灯t观察,拍照。结果参见图G.lo.;, ( )( lt-、f、() I 1 10001 三0001.,图G.松材线虫电泳检测图谱二可司-. . = 阻碍r.l-:.ll回r哩._.咽. . ,咱h1=1 t斗I.-J飞rr.4飞注:泳道M标准DNA;47-49松材线虫50-52拟松材线虫G. 2 松材线虫自动化分子检测13 DB21/T 3378-2021 G. 2.1 松材线虫病试剂盒组成成分名称数量成分DNA提取试剂A液2 m1/管x1管松材线虫裂解缓冲液DNA提取试剂B液2001/管x1管松材线虫消化酶pCR扩增混合K夜5001/管x1管含TaqDNA聚合。

    26、酶,dNTP的溶液PCR扩增混合P夜1501/管x1管特异性引物、探针线虫DNA阳性质控Y液751/管x1管松材线虫DNA片段阴性质控C夜1m1/管x1管无酶水G. 2. 2 适用设备松材线虫自动化分子检测系统48,松材线虫自动化分子检测系统48A,松材线虫自动化分子检测系统mlnl等松材线虫荧光定量PCR检测系统。G. 2. 3 检测方法将分离的线虫置于1.5mL悬浮液高,中浓缩,取底音1日液体20L,加入A夜20L.B液2L;金属浴中65C,40min, 95C, lOmin; 12000r!min离心3min,取上清液(线虫DNA溶液)。G.2.4 反应体系样品:线虫DNA溶液3.5L,加入K液5L,P液1.5L。阳性对照:线。

    27、虫DNA阳1主质控Y液3.5L,加入K夜5L.P液1.5 flL 阴性对照:阴性质控C夜3.5队,加入K液5flL.P液1.5L。G.2.5 反应程序将样品、阳性对照及阴性对照放入机器,选择仪器中松材线虫白动检测程序。G. 2. 6 反应结果松材线虫自动化分子检测系统采用自动程序判读检测结果,如表G.1、G.20表G.1 松材线虫自动化分子检测结果序号颜色主且别样品来源Ct恒判定结果1 1 Al 25. 83 含松材线虫2 1 A2 20. 23 含松材线虫3 1 A3 28.47 含松材线虫4 1 A4 2: 19 含松材线虫d 产1 A5 27. 38 含松材线虫6 1 A6 21. 28 含松材线虫7 1 阳性对照16. 65。

    28、 含松材线虫8 1 阴性对照不含松材线虫14 表G.2 松材线虫自动化检测结果先噩噩1 90 80 70 60 50 12时,含有松材线虫Ct35或者无Ct值,不含松材线虫35Ct30,可能出现假阳性,应重新检测。15 DB21/T 3378-2021 附录H(规范性)松材线虫分子生物学检验送检表位单一号检一样送一表H.1 松材线虫分子生物学检验送检表送检日期:采样地点样品数量树种备注注采样地点填写到小班。例如xx县xx镇(Xx林场)x x林班xx小班。16 坦E弓NO送检单位挥自毒虫样吕类型样昂来源检验方法检垃结5但同体1附件2形态盔走入里核入篮发附录|(规范性)松材线虫检验鉴定报告松树线虫检验鉴定报告中革昂纳号取特地点 形态怒足分子生韧学签定- 形态缝定报告一-分子生物学W;t侵告4三主物学鉴定入坦f叫|DB21/T 3378-2021 丁( )(XXX)营企坐定d-,u、每月日洼佯吕做币J自写选中全样吕总量虫丰丰岛炎掣填写因1M、本属等取停地点填写到小IJI:形态摇定、分子笠匍学鉴定填写检测巾使用的万i去检验结果填写结论n17 DB21/T 3378-2021 18 。

    1. 1、本文档共21页,下载后即可获取全部内容。
    2. 2、本文档由用户提供并上传,付费之前,请先通过免费阅读内容等途径辨别内容,收益归属内容提供方;如有侵权或不适当内容,请进行举报或申诉。
    3. 3、本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
    4. 4、万象文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
    提示  万象文库所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    关于本文
    本文标题:DB21∕T 3378-2021 辽宁省松材线虫病检验鉴定技术规程(辽宁省)
    链接地址:https://www.2wx.com/view-4562352.html
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 最近更新 - 网站客服 - 联系我们

    网站客服QQ:173720847

    copyright@ 2019-2021 万象文库(www.2wx.com)网站版权所有

    备案号:鄂ICP备19026039号-1

    本网站采用C2C交易模式,用户上传的文档直接被用户下载,网站仅作为一个中间服务平台,网站所有文档下载所得收入归上传人(包括作者)所有。万象文库网只提供储存空间,不会对上传内容本身作任何修改或编辑。如文件中包含任何侵犯您的版权或隐私,请立即通知我们,我们将立即予以删除!