临床医学论文-腹腔注射褪黑素受体拮抗剂对鸡脊柱发育的影响.doc

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1、临床论文腹腔注射褪黑素受体拮抗剂对鸡脊柱发育的影响作者:杨、杨、高锐、李明、摘要目的探讨腹腔注射褪黑素受体拮抗剂对鸡脊柱发育的影响。

方法将45只初孵绍兴土鸡随机分为3组，每组15只。

2、(对照组:孵化3天后，在白天光照12小时(照度500lx)，夜晚完全黑暗12小时(照度05LX)的条件下饲养。

(手术组:孵化后3d切除松果体，光照条件同对照组。

3、(拮抗剂组:孵育3天后每天腹腔注射褪黑素受体拮抗剂30mg/kg，光照条件同对照组。

4、结果3个月时，对照组和拮抗剂组均未出现脊柱侧凸，手术组有7只鸡出现脊柱侧凸。

5、结论切除松果体可降低褪黑素分泌，诱发部分鸡脊柱侧凸给予褪黑素MELl受体拮抗剂卢吲哚预防褪黑素不能产生实验性脊柱侧凸。

6、【关键词】受体；褪黑素；脊柱侧凸摘要:目的观察注射褪黑素MEL1-a受体拮抗剂抑制褪黑素作用后鸡脊柱的生长情况。

7、方法将45只新生小绍兴鸡分为3组:(将15只鸡(对照组)置于光暗(12h:12h)循环中，白天5001x，夜间0-51x。

(15只鸡(手术组)在3日龄时切除松果体。

他们被保持在与对照组相同的光照条件下。

8、(15只鸡(拮抗剂组)，褪黑激素的MEL1-a受体的拮抗剂(Luzindole，30mg/kg)在它们3日龄时每天腹部注射。

他们被保持在与对照组相同的光照条件下。

对所有鸡进行放射学检查。

结果对照组和拮抗剂组均未出现脊柱侧凸。

手术组有7只鸡在3月龄时出现脊柱侧凸。

结论松果体切除可降低褪黑激素的分泌，导致部分鸡脊柱侧凸。

但是注射卢吲哚来抑制malatonin的作用不能诱导鸡的实验性脊柱侧凸。

关键词:受体；褪黑素；国内外的脊柱侧凸研究已经证实1，2，雏鸡出壳后不久摘除松果体可导致脊柱侧凸，这种脊柱畸形与人类特发性脊柱侧凸非常相似。

此外，文献报道松果体肌内移植和褪黑素腹腔注射可防止松果体切除鸡脊柱侧凸的发展，否则，这种脊柱畸形将进一步加重3，4因此，学者推测褪黑素合成或代谢的紊乱是实验性脊柱侧凸的原因。

然而，目前对于低水平的褪黑激素如何影响肌肉系统有各种各样的猜测。

Kennaway5发现，褪黑素作用于兔子脊柱的部位是存在的。

据信，褪黑激素直接作用于这些部位，并通过复杂的作用调节脊柱两侧生长的对称性。

本实验用褪黑素受体拮抗剂抑制褪黑素的作用，观察鸡脊柱的发育，初步探讨褪黑素受体的作用。

材料与方法1动物分组将45只雌性绍兴鸡饲养在笼中，所有笼均置于温度控制在2832的室内。

鸡的饮食和商业鸡场是一样的。

饲料中不含褪黑素和与褪黑素相关的5-HT。

将动物随机分为3组，每组15只动物。

(对照组:孵化3天后，在白天控制光照12小时(光照5001x)，晚上12小时完全黑暗(光照051x)的条件下饲养。

(手术组:孵化后3d切除松果体，光照条件同对照组。

(拮抗剂组:孵育3天后，每天腹腔注射褪黑素MEL1a受体拮抗剂(Luz吲哚，美国CE公司)，共3个月，剂量为30mg/kg。

控制照明条件与对照组相同。

2麻醉及手术方法腹腔注射硫喷妥钠(50mg/kg)进行全身麻醉后，在鸡头顶部做正中切口，切开皮肤。

用7号刀片刮去表面筋膜可减少出血，在额骨和顶骨融合处做一个方形切口，形成方形颅骨瓣。

切开硬脑膜窦，暴露松果体，用精细的显微手术钳取出松果体，最后复位颅骨瓣不缝合，关闭皮肤切口。

3线检查3个月后，所有动物注射过量硫喷妥钠(100mg/kg)后处死。

拍摄x线片，测量并记录脊柱侧凸的发生率和程度。

脊柱侧凸的标准是前后位片上的脊柱侧凸角度(Cobb法)大于10。

结果对照组1例死于喂养时腹泻，拮抗剂组1例死于腹腔注射后感染。

手术组除2例因术中大出血死亡外，其余均健康存活。

动物死亡被排除在研究之外。

对照组和拮抗组均未出现脊柱侧凸。

松果体切除后3个月，A组13只鸡中有7只出现脊柱侧凸，发生率为8%。

其主侧弯角度为1154，平均2。

右胸后凸4例，左胸后凸1例，右胸腰椎后凸2例(图。

图1手术组一只右胸后凸鸡的X线片，其主要后凸角度为3讨论1褪黑激素是色胺通过四种酶的一系列作用产生的吲哚类物质，主要由松果体分泌。

最近的研究发现，褪黑素不仅参与调节昼夜节律、体温、性成熟、免疫和心血管系统功能，还参与调节脊柱发育的对称性。

以前的研究表明，鸡松果体切除可以产生脊柱侧凸。

推测褪黑素可能在特发性脊柱侧凸的发病机制中起重要作用6，但褪黑素受体在这一过程中的作用尚不清楚。

目前发现褪黑素受体广泛分布于中枢神经系统，有三种膜受体，分别是MEL1a、MEL1b和MEL1c。

褪黑素受体在脊柱侧凸发病机制中的研究可能是特发性脊柱侧凸病因学研究的突破点。

2Machida等人7在大量实验的基础上发现，褪黑素缺乏可导致中枢神经系统的紊乱，包括下丘脑、脑干、小脑和脊髓的紊乱，进而可能导致机体的失衡和脊柱及椎旁肌肉的不对称发育。

麦金尼斯8报道，在椎体中存在褪黑激素的活性部位。

这些位点特征性地含有一个受体。

Budden等9报道褪黑素可以促进培养软骨细胞的分化和骨化。

Brodner等10认为褪黑素可能直接作用于脊髓的部位，这一点在兔中央灰质(X板层)的实验中已得到证实。

这些结果表明，除了中枢神经系统之外，褪黑激素对调节骨生长和椎体成形具有直接的主要作用。

然而，褪黑素受体与脊柱侧凸的关系尚不清楚。

3在本实验中，腹膜内注射褪黑激素MEL1a受体的竞争性拮抗剂(Luz吲哚)的剂量为30mg/kg，选择该剂量是因为它可以成功阻断小鼠中褪黑激素的作用11然而，没有产生预期的实验性脊柱侧凸模型。

因此，松果体切除产生的鸡脊柱侧凸模型有可能是通过褪黑素的中枢或外周MEL1a受体起作用的，其他受体是否在脊柱侧凸的发病机制中起作用还需要进一步的实验证实。

【参考文献】【1】波特RW。

特发性脊柱侧凸的发病机制:非耦合的神经-骨生长。

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2王婷，胡友谷，郑英刚，等.褪黑素在鸡脊柱侧凸模型中的作用J.中国骨科杂志，20XX，623-626。

3朱晓东，李铭，侯铁生，等.不同剂量褪黑素对去松果体鸡脊柱侧凸发生率的影响J.中国骨科杂志，20XX，436-438。

4伯德贾。

特发性脊柱侧凸病因学的现有理论J.临床整形外科，1998年，114-119。

5肯纳威DJ。

褪黑激素与发育:生理学和药理学J.塞明佩里纳托尔，20XX年，第4期，第258-266页。

6曹洪海，顾素喜，李明。

褪黑素在特发性脊柱侧凸发病机制中的研究进展J.中国骨科杂志，20XX，1323-1325。

7BrodnerW，KreplerP，NicolakisM，等.褪黑素与青少年特发性脊柱侧凸J.骨关节外科杂志，20XX，399-403。

8麦金尼斯E，希尔DL，拉索VJ，等.青少年特发性脊柱侧凸患者的振动反应J.骨关节外科杂志，1991，1208-1212。

9巴登党卫队，枪毙了我。

Rett综合征中骨质减少的可能机制:骨组织形态计量学研究J.儿童神经病学杂志，20XX，698-702。

10MachidaM，DuboussetJ，ImamuraY，等.褪黑素缺乏在松果体切除鸡脊柱侧凸发生中的作用J.骨关节外科杂志，1995，134-138。

11SugawaraT，screeningPA，IuvonePM，等.褪黑素拮抗剂luzindole对大鼠视网膜光感受器的保护作用J.中国神经科学杂志.InvestOphthalmolVisSci，1998，2458-2465。