临床医学论文-脆性组氨酸三联体基因及p53基因在肺癌组织中的表达及意义.doc

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1、临床论文-脆性组氨酸三联体基因和p53基因在肺癌中的表达及意义摘要目的探讨脆性组氨酸三联体基因(FHIT)在肺癌中的表达及其与肺癌分化程度、组织学分类和p53表达的关系。

2、方法应用组织芯片和免疫组化技术，分别检测110例肺癌和25例良性病变中FHIT和p53蛋白的表达。

3、结果that在良性肺组织中的异常表达率为16%，在肺癌组织中的异常表达率为5%。

4、肺癌与良性肺组织之间有显著差异(Pp53异常表达和FHIT异常表达的共检出率为6%结论FHIT蛋白可能成为肺癌早期诊断更有效的分子标志物，联合检测p53蛋白和FHIT蛋白有助于提高肺癌的检出率。

5、FHIT蛋白影响肺部肿瘤细胞的分化方向，为临床药物开发提供新思路。

6、【关键词】肺癌；脆性组氨酸三联体基因(FHIT)；摘要:目的探讨FHIT基因在肺癌中的表达及其与分化程度、组织学类型和p53基因表达的关系。

7、方法应用免疫组织化学和组织芯片技术检测110例肺癌和25例肺良性病变标本中FHIT和p53的表达。

8、结果肺良性病变中FHIT异常表达率为16%，肺癌中异常表达率为5%，两者差异非常显著(P因此，探索FHIT基因与肺癌的关系可能会为肺癌发病机制的研究找到突破口。

本研究采用免疫组化技术和组织芯片技术检测110例肺癌和25例良性病变中FHIT和p53的表达，探讨FHIT与肺癌发生、发展和生物学行为的关系。

材料与方法1材料110例肺癌和25例良性肺组织来自北京友谊医院。

所有肺癌患者术前均未接受化疗和放疗。

有经验的病理医师根据WHO肺和胸膜组织学分类1999年第3版标准复查病理切片，其中鳞状细胞癌40例，腺癌58例，其他癌12例。

其中高分化癌53例，中分化癌31例，低分化癌26例。

所有组织用10%福尔马林固定，石蜡包埋。

北京友谊医院病理科构建了26三种组织芯片。

每组芯片均采用正常肾组织作为定位标记，芯片直径6mm，芯片厚度4m(略)。

2主要试剂和方法兔抗人FHIT多克隆抗体购自中山生物技术有限公司和美国ZYMED公司。

鼠抗人p53单克隆抗体和SP试剂盒购自福州迈信生物技术发展公司，均为美国NEOMARKERS公司产品。

手术是根据成套工具的说明进行的。

用磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照，高压修复用于抗原修复。

3结果表明，FHIT蛋白在正常肺组织中主要表达于支气管上皮细胞、型肺泡上皮细胞和部分肺癌细胞的胞浆和胞核中。

此外，上皮组织周围的一些细胞，如淋巴细胞和组织细胞，可在细胞核和细胞质中呈阳性表达，呈棕黄色颗粒，如图1所示。

FHIT蛋白的阳性强度和阳性率按沈浩等1的方法观察先根据染色强度评分:无色为0，淡黄色为1，棕褐色为2，棕褐色为3；然后按阳性细胞百分比计分:阳性细胞75%为4分；染色强度与阳性细胞百分比的乘积得到一个评分范围:012。

912为强阳性(+)，58为阳性(+)，04为弱阳性(+/-)，不表示(-)定义肺癌组织中FHIT蛋白免疫组化染色强阳性为正常表达，其余视为FHIT基因表达降低或缺失，即异常表达。

P53蛋白位于细胞核内，呈弥散或散在的粗细不等的棕黄色颗粒，如图2所示。

根据Kim等人2的方法，未染色或表达细胞百分比30%为阴性，表达细胞百分比30%为阳性。

p53在肺癌中的阴性表达是正常的，而阳性表达是异常的。

4统计处理所有数据均采用SPSS5统计软件包进行处理，采用RC行乘法表2检验和计数数据的相关分析，判断标准为P2肺癌中FHIT基因与p53基因表达的关系1阴性表达组与p53阳性表达组FHIT基因表达无显著差异(P，见表4。

表4肺癌中FHIT和p53表达的相关性p53病例数(略)注:2=765，P2p53异常表达与FHIT异常表达有显著性差异(P研究表明，FHIT异常发生在与外部环境相关的组织中，如胃、结肠、子宫颈和肺3FHIT基因在染色体上占据约1Mb的位置，cDNA全长1095bp，由10个外显子组成，编码长度为500bp4关于肺癌组织中FHIT基因变异的研究很多。

Sozzi等5报道，约80%的小细胞肺癌和40%的非小细胞肺癌存在FHIT转录异常，90%的肺癌存在杂合性缺失(LOH)。

本研究用免疫组织化学方法检测了110例肺癌标本和25例良性肺组织。

发现肺癌组织和良性肺组织中FHIT基因表达有显著差异(P本研究结果提示FHIT基因在正常组织中高表达，在肿瘤组织中低表达，提示FHIT基因可能参与了肺癌的形成。

目前，关于FHIT基因表达与肺癌组织分化程度关系的报道不一致。

结果表明，FHIT在不同分化程度肺癌中的表达有显著差异(P因此，如果临床药物研究能够开发出FHIT蛋白并将其导入肿瘤组织，可能会促进肿瘤表型的逆转，从而达到治愈肿瘤的目的。

Tomizawa等人6表明，在不同组织类型的肺癌中，FHIT蛋白减少的百分比是不同的。

本研究表明，FHIT基因在不同组织学类型肺癌中的表达无显著差异(P，这与Tomizawa的研究不一致。

因此，FHIT基因表达与肺癌组织学分类的关系有待进一步研究。

p53基因的突变及其在人类肿瘤中的抗肿瘤作用已被深入研究，突变型p53蛋白易于通过免疫组织化学检测。

因此，突变型p53蛋白的检测已成为临床肿瘤诊断的重要标志。

本研究发现肺癌组织中FHIT的异常表达率明显高于p53的异常表达率(P然而，p53蛋白阴性表达组和p53蛋白阳性表达组的FHIT表达差异无统计学意义(P因此，该研究提示肺癌组织中FHIT蛋白缺失与p53蛋白异常无相关性，FHIT是独立的表达指标，FHIT失活可能是独立于p53的生物通道，与研究一致。

同时，本研究发现p53和FHIT的异常表达率分别为6%和4%，表明FHIT异常表达比p53异常表达更为普遍。

因此，在肺癌诊断中，FHIT蛋白可能是比p53蛋白更有效的分子标志物。

此外，p53异常表达和FHIT异常表达的共检出率为6%，表明结合基因表达蛋白检测可以提高肿瘤的检出率。

综上所述，本研究结果表明，肺癌中FHIT蛋白表达减少或缺失，且与肺癌组织的分化程度密切相关，而FHIT表达与p53表达无关。

提示FHIT蛋白可能是一种重要的肿瘤抑制蛋白，在肺癌的发生发展中起重要作用。

FHIT蛋白易于免疫组化检测，有可能成为继p53蛋白后一种新的、更有效的肺癌临床诊断标志物。

(此图见164页)参考文献1郝晓萍，WillisJE，pretlowTG，等.结直肠癌和癌前病变中脆性组氨酸三联体表达的缺失J.癌症研究，20XX，60(:18-21。

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