临床医学论文-胰腺炎相关性腹水诱导的大鼠胰腺病理学改变.doc

临床论文——胰腺炎相关性腹水大鼠胰腺病理改变作者:赵海建，程若川，方向，张建怀，张锡成[摘要]目的观察腹腔注射胰腺炎相关性腹水(PAAF)引起的胰腺病理改变。 方法将26只SD大鼠随机分为急性出血坏死性胰腺炎组(AHNP组，n=10)、生理盐水组(NS组，n=8)和PAAF组(n=8) 制备急性出血坏死性胰腺炎腹水后，腹腔注射给健康大鼠，7小时后处死。取胰腺进行光镜和电镜观察。 结果PAAF组胰腺病理变化显示腺泡细胞完整，小叶间隔轻度增宽。 结论腹腔注射PAAF引起的胰腺病变轻微。 【关键词】胰腺炎；腹水；胰腺；目的探讨腹腔注射PAAF后大鼠胰腺的病理变化。方法将26只SD大鼠随机分为AHNP组(n=10)、生理盐水组(n=8)和PAAF组(n=8)。将PAAF注射入SD大鼠腹腔。7小时后，SD大鼠被杀死。观察胰腺的变化。结果形态学检查显示PAAF组胰腺腺泡细胞良好，腺泡间距变宽。结论PAAF组胰腺病变轻微。胰腺炎；胰腺炎；禁欲液；胰腺；在急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)中，一方面胰腺的病理改变产生的各种炎症因子作用于全身各个器官造成损害，另一方面其腹水吸收入血后可对器官造成损害。 本实验给大鼠腹腔注射胰腺炎相关腹水，观察AHNP时腹水对健康大鼠胰腺的影响。报告如下。 材料与方法1.1.26实验动物和成年SD大鼠分组，雌雄不限，体质量250~300 g，由昆明医学院动物学系提供。 将大鼠随机分为三组:AHNP腹水制备组(AHNP组，n =10)、生理盐水对照组(生理盐水组，n=8)、胰腺炎相关性腹水腹腔注射组(PAAF组，n=8) 生理盐水组和PAAF组于腹腔注射后7h处死，检测相关指标。 1.2 PAAF的制备、收集和处理参考文献[1-3]，诱导建立大鼠AHNP，造模成功后30分钟取腹腔渗出液测定淀粉酶，浓度为(2 ~ 100，000 U/L)的纳入本实验(本组试验全部合格) 诱导AHNP后7小时处死大鼠，无菌条件下剖腹收集腹腔渗出物(PAAF)，4℃下以2 500 r/min离心15 min后收集上清液。 每只AHNP大鼠产生5~10 ml PAAF，10只大鼠收集70 ml，保存于-80℃备用。AHNP大鼠胰腺标本用10%福尔马林固定。 PAAF组大鼠腹腔注射PAAF 8 ml/只，生理盐水组大鼠腹腔注射生理盐水8 ml/只。腹腔注射后7小时处死，取样检测。 1.3胰腺的组织学观察取活杀动物的胰腺，置于10%福尔马林固定液中，常规病理切片，he染色，Olympas显微镜观察并拍照。 另取0.5 cm3胰腺组织，在4℃2%戊二醛溶液中固定，用日立19-600-2透射电镜观察。 2胰腺的组织学观察2.1一般观察到正常大鼠的胰腺位于胃和十二指肠胰腺之间，呈片状，粉红色(见图1)。 AHNP组大鼠出现胰腺出血，大部分或全部坏死，网膜、腹膜、肠壁出现皂化斑，血性腹水(见图2)。实验组胰腺仅部分水肿，无明显出血和坏死。 2.2光镜下可见AHNP组胰腺大部分坏死，腺体结构消失，大量炎性细胞浸润并伴有出血(见图3、4)。 图5显示NS组胰腺组织的叶间隔。 PAAF组仅部分腺体组织水肿，组织间隙增宽，几乎无炎性细胞浸润(见图6)。 2.3电镜观察电镜下，可观察到NS组胰腺组织细胞结构正常，酶原颗粒被膜完整(见图7)；然而，在PAAF组中，仅观察到线粒体轻度肿胀和部分内质网扩张，而酶原颗粒的包膜完整(见图8)。 3.AHNP腹水中不仅含有大量胰酶，还含有大量其他毒性物质，包括作用于组织细胞的氧自由基毒性产物丙二醛、对细胞有直接毒性作用的游离脂肪酸、淀粉酶、脂肪酶、磷脂酶A等毒性物质，以及TNF-a、IL、LPS等一系列炎症细胞因子。 这些物质可直接导致腹腔内的组织损伤，它们的进一步吸收也可加重AHNP的全身损伤。 长期以来，AHNP胰腺外器官损伤机制的研究一直是人们关注的焦点。 一方面，坏死胰腺产生的各种损伤因子进入血液后可造成损伤；另一方面，腹水中的炎症介质吸收后也可产生损伤效应。文献[3-4]报道，胰腺炎腹腔注射腹水可引起肝脏和肠道组织损伤。 因此，我们将PAAF注射到健康大鼠的腹腔内，观察PAAF对胰腺的影响。 AHNP胰腺的典型病变多为胰腺坏死、腺体结构消失、血管极度充血、大量炎性细胞浸润伴出血性改变。 实验结果表明，腹腔注射PAAF后，胰腺出现轻度水肿变化，表现为腺泡细胞完整，小叶间隙轻度增宽，但有少量炎性细胞浸润。电镜下仅腺泡细胞内线粒体轻度肿胀，部分内质网扩张，而酶原颗粒包膜完整，表明腹腔注射PAAF引起的胰腺病理改变轻微。 Fujita等[5]也发现腹腔注射PAAF不能加重急性水肿性胰腺炎胰腺的病理改变，这与本实验结果一致。 胰腺炎相关腹水引起的胰腺病变轻微。如果我们在此基础上研究胰腺炎相关腹水对其他器官的影响，我们可以探索AHNP其他器官的损害机制，并在模拟临床条件下评价腹水在胰腺炎发病中的作用。 同时我们也应该看到，本实验只观察了腹腔注射PAAF 7小时后的胰腺变化。因此，有必要增加样本数量，延长观察时间，以进一步评估PAAF对胰腺组织学的影响。 [1]米兰妮，佩雷拉，多尔尼克夫，等.重症胰腺炎相关性急性肺损伤大鼠的呼吸力学和肺形态计量学[J].危重病护理医学，1995年，23 (10): 1882-1889。[2]，唐，，赵萍，等.生长抑素对猴急性坏死性胰腺炎的治疗作用[J].中国实验外科杂志，1998，15 (5): 402。[3]程若川，，，等.中国农业大学学报. 22 (8): 947-949 .[4]方向，程若川，赵海建，等. PAAF致肠道损伤的实验研究[J].昆明医学院学报，2006，(2): 47-51。[5]藤田M，政宗A，佐藤A等。急性重症胰腺炎大鼠实验模型的建立[j].胰腺，2001，22 (4): 409-418。(编辑:金)