临床医学论文-脊柱结核病尿脱氧吡啶啉检测及其临床意义.doc

1、 临床论文脊柱结核患者尿脱氧吡啶啉的检测及其临床意义【摘要】通过测定脊柱结核患者尿脱氧吡啶啉(DPD)，观察其变化与脊柱结核的关系。评价其在肺结核继发脊柱结核筛查诊断中的临床意义 方法采用自动化学发光免疫分析法和自动化学分析法检测脊柱结核组、肺结核组和健康对照组的尿DPD水平，其中尿DPD用尿肌酐(Cr)校正。)(DPD/捷克。)，并对检测结果的诊断有效性进行分析。 结果脊柱结核患者、肺结核患者和健康对照者的DPD测量值分别为(14。99.8) mol/mol铬。(6.42.6) mol/mol铬。和(6.32.0) mol/mol铬。脊柱结核患者的尿DPD明显高于结核患者和健康成人。 肺结核

2、患者和健康对照者之间的尿DPD没有显著差异(P=0.751) 脊柱结核患者尿DPD受试者工作特征曲线下面积(ROC)为0.83。在ROC曲线下，当DPD的测定值为8.4 mol/mol Cr时。诊断脊柱结核的敏感性和特异性分别为87%和73%。 结论脊柱结核可引起骨代谢的改变。尿DPD能敏感地反映脊柱结核的骨吸收。尿液DPD检测有助于结核病继发脊柱结核患者的早期筛查。 关键词脊柱结核结核尿脱氧吡啶啉摘要:目的探讨脊柱结核患者尿脱氧吡啶啉(DPD)的变化并评价其临床意义。方法将所有受试者分为三组:第一组，STB患者；第2组，肺结核患者:第3组，健康对照。ACS:180自动化学发光系统检测DPD。

3、对尿DPD值进行尿肌酐校正，以克服混杂变量，如体重指数和尿液稀释。对结果进行了分析。结果脊柱结核、肺结核和健康对照者的DPD平均尿浓度为1(4 . 999 . 8)m ol/molCr。、(6.42.6) mol/mol铬和(6 . 32 . 0)m ol/mol铬。，分别为(P值=0.001，0.000)。脊柱结核患者的DPD尿排泄量高于非脊柱结核患者。肺结核组和健康对照组之间没有差异(P=0.751)。DPD有较好的受试者工作特征(ROC)曲线，ROC曲线下面积为0.83。对于DPD，灵敏度(87%)和特异度(73%)在8.4 mol/ mol肌酐的截止水平上观察到。结论STB患者存在骨代

4、谢活性的改变。DPD可使骨吸收急剧增加。尿DPD测定可为肺结核合并STB的评估提供重要的参考价值。关键词:脊柱结核；肺结核；尿脱氧吡啶啉脊柱结核是一种常见的肺外结核，原发病灶多为肺结核。如果能在结核病人中早期发现脊柱结核，那么脊柱结核的早期诊断和早期治疗不仅可以降低手术难度，还可以提高手术治愈率。 在结核侵入骨骼的过程中，有骨质流失。通过检测骨丢失可以实现脊柱结核的早期筛查吗？作者检测了96例脊柱结核患者、肺结核患者和健康对照组的尿DPD水平，探讨了脊柱结核患者尿DPD水平的变化及其临床意义。 1对象与方法1.1脊柱结核病例组的选择:选择2004年5月至2005年5月脊柱结核患者33例，其中男

5、性16例，女性17例；年龄30 46岁，平均(36.388.5)岁。 入院后，所有患者均通过胸片或胸部CT排除活动性肺结核。 所有脊柱结核患者的诊断均经病理证实，选择与观察组性别、年龄相匹配的对照组。 肺结核对照组:随机选择2004-05/2005-05肺结核患者33例，男17例，女16例。年龄2843岁，平均(34.49.4)岁。 通过X线、CT或MRI排除肺外结核，如脊柱结核 健康对照组:我院体检无异常的健康人30名，年龄、性别与患病组匹配，既往无结核病及肺外结核病史，其中男15名，女15名；年龄25 39岁，平均(268.4)岁。 为排除其他可能影响尿DPD水平的因素，上述受试者按以下标

6、准入选:(1)实验前(近一个月)及实验过程中，未使用以下药物，包括免疫抑制剂或增强剂、钙、维生素D及其他影响骨代谢的药物。 (2)无下列慢性病:严重肝肾功能不全、消化系统疾病、内分泌系统疾病、高血压、代谢性骨病、恶性肿瘤和骨折(6个月内) (3)无艾滋病病毒感染或怀孕 1.2方法1.2.1标本的采集和处理按Zaninotto 1方法，对病例组、结核病对照组和健康对照组受试者空腹取晨尿，受试者在试验前10小时禁止进食，取第二天自然排出的晨尿10 ml。 避光-2无霜冰箱保存，集中统一编号，解冻，混匀，离心，测定DPD浓度。 用特殊的移液管将10 ml样品吸入离心管，并以1 000 r/min的速

7、度离心15分钟。 取3 ml上清液至反应杯中，确保样本中没有颗粒和泡沫。 根据测试程序测试样本。 1.2.2主要仪器和试剂仪器有ACS:180SE全自动化学发光免疫分析仪和BACKMAN全自动生化分析仪。 试剂为尿液DPD分析试剂盒，DPD酶联免疫试剂盒为美国拜耳医药保健公司产品。 肌酐检测采用美国贝克曼库尔特有限公司试剂产品。 1.2.3实验方法ACS:180尿DPD检测是一种高灵敏度的直接化学发光免疫竞争法，测定采用双盲法。 根据试剂盒提供的说明书，试验应严格按照操作规程进行。 尿DPD可以根据身体质量指数引起的差异和尿肌酐引起的稀释因子进行校正。 对同一份尿样进行肌酐、肌酐的检测。采取

8、杰夫氏速率法、贝克曼库吉特全自动生化分析仪、苦味酸法。 结果表示为尿DPD浓度(nmol/L)与尿Cr的比值。(mmol/L)，即尿DPD排泄率。 1.3统计处理所有数据均采用x-s计量，方差齐性检验表明方差不均匀。 组间比较采用单变量分析的秩和检验。 通过线性相关分析了两个因素之间的相关性。 通过受试者工作特征曲线(ROC)与假阳性(1-特异性)比率的阳性(敏感性)比率来评估测试的相对有效性。 P 8.00 mol/mol Cr。脊柱结核诊断的敏感性为88% (29/33)，特异性为70%(23/33)，临床诊断符合率为66.7% (22/33)。 此外，对照组的5%(33例中的2例)的DP

9、D测量值高于参考值的上限。 图1脊柱结核、肺结核和正常人的尿脱氧吡啶啉(DPD)浓度 图中水平实线代表相应测量值的平均值，虚线为参考值的上限。)2.3用受试者工作特征曲线评价ROG曲线诊断试验对脊柱结核DPD的性能，通过改变诊断界值得到敏感性和假阳性率(1-特异性)的值。以灵敏度为Y轴，特异性为X轴，绘制ROC曲线，计算并观察ROC曲线下面积(表 当这种方法的值为0.5时，是一种无意义的诊断方法。如果曲线下面积为1，这是一个完美的诊断方法。 尿DPD诊断脊柱结核的ROC曲线如图2所示，ROC曲线下面积分别为0.83。对于DPD，当截止值为8.4 mol/mol Cr时。灵敏度和特异度分别为87

10、%和73% 表2 ROG曲线下面积检测器面积标准误p值95%置信区间5下限和上限DPD.832.054.000.727.937 3讨论脊柱结核是最常见的骨关节结核之一。 大多数病例的主要病灶是肺结核。如果诊治不及时，容易累及椎管，造成脊髓和神经受压而导致截瘫，致残率和死亡率高。 近50年来，虽然以脊柱结核病灶清除和脊柱重建为主的综合治疗取得了很大进展2，但术后不愈合和复发率仍高达13 26% 3 如果能早期发现脊柱结核，大部分可以通过药物等保守治疗治愈。而且早诊断早手术还可以降低手术难度，减少患者的手术创伤和并发症，提高手术治愈率。 结核病的实验室诊断包括涂片、细菌培养和免疫学试验4细菌学检查

11、是诊断结核病的“金标准”。但由于结核病的遗传特征决定了生长期较长，常规细菌学检查方法存在灵敏度低、操作复杂、时间长、影响因素多等缺点5 目前，脊柱结核的临床诊断主要依靠临床症状和影像学资料等。这些临床表现多出现在疾病的中晚期。当平片发现许多脊柱骨质破坏时，50%的骨矿物质丢失。 MRl和CT引导下椎体穿刺活检的应用也因为一般筛查中的价格因素而受到限制。 因此，临床上迫切需要找到一个简单、早期筛查脊柱结核的重要指标。 在结核感染骨的过程中，炎性细胞产生许多炎症介质如IL-1、IL-6、TNF-等细胞因子。 这些细胞因子通过直接和间接的免疫途径作用于破骨细胞，从而引起骨吸收。另一方面，它们刺激免疫

12、系统促进IL-8急剧升高，增加无菌性炎症反应，可能在骨结核浸润阶段起诱导作用6 组织中骨矿物质成分占细胞外基质的65%，通过检测血液、尿液等体液中骨代谢生化标志物的变化，可以间接反映骨的生理状态。 本实验通过检测骨吸收标志物，从而早期发现骨破坏，进而在结核患者中发现骨结核。 近年来，出现了许多新的骨代谢生化标志物，脱氧吡啶啉(DPD)已被公认为骨吸收的敏感而特异的生化标志物。 目前，检测DPD的方法很多。ACS180 SE自动化学发光免疫分析法操作简单，检测准确，价格合理，灵敏度为1 g/ml，已被大多数实验室采用8 在国内外相关文献中，可以报道通过检测尿DPD来分析其他疾病的骨量变化，但观察

13、分析脊柱结核患者骨破坏过程中的骨量变化，进而对脊柱结核患者进行早期筛查，国内外文献未见报道。 本实验采用ACS180化学发光免疫分析系统测定脊柱结核患者的尿DPD/尿铬水平，并与健康对照组和结核组的结果进行比较，分析三组患者之间DPD的差异。 本实验测定了健康对照组、肺结核组和脊柱结核组的DPD浓度，脊柱结核组测定值最高，肺结核组次之，健康组最低，分别为(14 . 999 . 7)m ol/mol Cr。(6.42.6) mol/mol铬。和(6 . 32 . 0)m ol。 经统计学处理发现，脊柱结核组、结核组与健康对照组之间有显著性差异(P=0.000)，而结核组与健康对照组之间无显著性差

14、异(P=0.831)。 与单纯结核患者和健康对照组相比，脊柱结核患者尿中DPD浓度明显升高，表明脊柱结核患者在其病变的病理过程中刺激破骨细胞，破骨细胞的作用增强。在被破坏的骨组织的有机成分中，I型胶原蛋白是主要成分，I型胶原蛋白的重要分解产物是脱氧吡啶啉，它不能被肝脏代谢，以原形从尿中排出后，尿DPD增加。 然而，在肺结核患者和健康对照组中，尿DPD显示正常水平，因为病变不在骨中或在骨中没有病变。 这一结果进一步证实了脊柱结核的病理表现多为破骨细胞。 尿DPD是脊柱结核骨破坏的一个可靠的生化标志物。 本实验采用受试者工作特征曲线评价诊断测试的性能，DPD曲线下面积为83%。 当截止值为8.4

15、mol/mol Cr时。其诊断脊柱结核的敏感性和特异性分别为87%和73%。 在这个例子中，ROC曲线下的面积是0.83 一般曲线下面积在0.5 0.7时，诊断准确率较低。当曲线下面积为0.7 0.9时，诊断准确率中等；当曲线下面积大于0.9时，诊断准确率高。 总之，脊柱结核患者在疾病发展过程中存在骨代谢的改变，这可以敏感而特异地反映尿DPD。 检测尿DPD的变化有助于脊柱结核患者与肺结核患者的早期筛查。 尿DPD测定具有干扰因素少、标本易留、无创伤、测定方便快捷等优点，可考虑作为脊柱结核辅助诊断的有效实验室参考指标。 参考文献 1 Zani Notto M，等.骨吸收标志物测定标准标本的建议

16、J.临床拉巴纳尔杂志，1998年，12:145-149。2金大东，曲德斌，陈，等.一期前路椎体间植骨内固定术治疗胸腰椎结核J.欧洲脊柱杂志，2004年，13: 114-121。3石，王.脊柱结核术后不愈和复发的原因，中华骨科杂志J.2005,13: 1184-1187.4朱利安E、米塔斯L、赫曼德斯A等.对基于免疫球蛋白的新型结核病血清学诊断试验的评估。抗Kp-90抗原的检测J.国际肺结核病杂志，2000，4:1082-1085。5安热比KII、阿尔瓦拉多-加尔维斯C、皮内达-加西亚L等。改良的痰镜检法对肺结核的诊断更敏感j.国际管肺疾病杂志，2000，4: 684-687。6张春宝，张蓉，马选祥，等.牙周治疗对种植体周围龈沟液中IL-1、IL-6和TNF-表达的影响J.牙髓牙周病学杂志，2005，7: 373-376。7贾承尧，李萍。尿吡啶和脱氧吡啶是骨吸收特异性的生化标志物J。中国临床康复，2000。Laurence M，Demers，R .等.对影响尿吡啶啉和脱氧吡啶啉分析前变异性的因素的评估和建议J.临床化学，2002，48:220-235。