临床医学论文-胶质瘤GFAP、S-100、Vimentin的表达及其与肿瘤恶性程度关系的研究.doc

临床论文-GFAP、S-100、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度关系的研究作者:张坤、王雅捷、刘晓倩、张新庆【关键词】胶质瘤【摘要】目的探讨星形细胞瘤中GFAP、S-100、波形蛋白的表达以及这三种蛋白的表达与肿瘤恶性程度的关系。 方法应用he染色和S-P法分析276例星形细胞瘤中GFAP、S-100和波形蛋白的表达。 结果星形细胞瘤中，S-100多为全细胞GFAP阳性。GFAP和波形蛋白主要为胞浆型阳性；纤维性和原浆性星形细胞瘤中GFAP和S-100明显阳性，波形蛋白反应弱。3种肿瘤标志物在毛细胞型和肥胖型星形细胞瘤中呈强阳性，且随着星形细胞瘤恶性程度的增加，GFAP和S-100的强度降低，而波形蛋白反应的强度增加。GFAP、S-100和波形蛋白的表达与星形细胞瘤的恶性程度显著相关。 结论GFAP、S-100和波形蛋白可作为星形细胞瘤恶性程度的指标。 脑胶质瘤GFAP S-100波形蛋白免疫组化[摘要]目的检测脑胶质瘤中GFAP、S-100和波形蛋白的表达，探讨GFAP、S-100和波形蛋白在组织学分级中的价值。方法应用HE和SP免疫组化技术检测276例人脑胶质瘤中GFAP、S-100和波形蛋白的表达。结果S-100蛋白呈全细胞染色；星形细胞瘤中GFAP和波形蛋白呈强阳性染色。GFAP和S-100蛋白在纤维性和原浆性星形细胞瘤中呈强阳性，而波形蛋白呈弱阳性。在毛细胞型和精细胞型星形细胞瘤中，三种标记物均呈强阳性，且随着星形细胞瘤程度的增加，GFAP和S-100蛋白的强度降低，而波形蛋白的强度增加。肿瘤标志物的数量与肿瘤的恶性程度有一定的相关性。结论GFAP、S-100波形蛋白可作为判断星形细胞瘤恶性程度的指标。关键词胶质瘤GFAP S-100波形蛋白免疫学星形细胞瘤是中枢神经系统。作为最常见的恶性肿瘤之一，易复发并逐渐发展为预后不良的恶性肿瘤，因此一直是神经外科治疗的重点和难点。在治疗过程中，对其分化程度的正确诊断和判断往往是治疗的关键。 已发现某些特定蛋白质的表达可能与肿瘤的恶性程度和预后有关。通过分析免疫组化染色的结果，我们可以更准确地反映所提交肿瘤的性质[1] 本研究采用免疫组织化学方法检测了276例人脑星形细胞瘤中GFAP、S-100和波形蛋白的表达，并与肿瘤的恶性程度进行了比较。 材料与方法1.1 1990年至2000年，哈尔滨医科大学第一附属临床医学院神经外科手术切除276例星形细胞瘤石蜡包埋标本，其中男性153例，女性123例，年龄5 ~ 76岁，平均年龄(45.94±17.98)岁。 根据1993年WHO中枢神经系统肿瘤分类[2]，ⅰ级星形细胞瘤76例，ⅱ级星形细胞瘤108例，ⅲ级星形细胞瘤52例，ⅳ级星形细胞瘤40例。 1.2方法组织经10%福尔马林固定，石蜡包埋，5μm连续切片，水脱蜡，he染色，严格按照S-P试剂盒说明进行免疫组化染色，苏木精染色，脱水透明，在DAB-H 2 O 2显微镜控制下显影。 阴性对照用磷酸盐缓冲液代替第一抗体。 肿瘤细胞胞质和胞核的染色强度高于背景非特异性染色。 根据染色阳性细胞的百分比，染色强度可分为四级:随机计数10个高视野肿瘤细胞，细胞不染色，与背景一致为(-)，阳性细胞占1% ~ 25%为(+)，阳性细胞占25% ~ 50%为(++)，阳性细胞占50%以上为(++) 1.3统计处理所有数据用SPSS统计软件统计，用χ 2检验。 结果星形细胞瘤中，S-100多为全细胞阳性；GFAP和波形蛋白主要为胞浆型阳性；纤维性和原浆性星形细胞瘤中GFAP和S-100明显阳性，波形蛋白反应弱。三种肿瘤标记物在毛细胞型和肥胖型星形细胞瘤中呈强阳性。 2.1表达与星形细胞瘤病理分级的关系。276例星形细胞瘤中，GFAP阳性240例，占86.96%，且GFAP免疫组化染色强度随星形细胞瘤病理分级增高而减弱。 见表1。 表1 276例星形细胞瘤的GFAP染色结果显示了S-100的表达与星形细胞瘤病理分级之间的关系。在276例星形细胞瘤中，S-100阳性253例，占91.67%，且S-100免疫组化染色强度随星形细胞瘤病理分级的升高而降低。 见表2。 表2 276例星形细胞瘤的S-100染色结果略2.3波形蛋白的表达与星形细胞瘤病理分级的关系。276例星形细胞瘤中，波形蛋白阳性196例，占71.01%，GFAP免疫组化染色强度随星形细胞瘤病理分级的升高而降低。 见表3。 表3 276例星形细胞瘤波形蛋白染色结果略3中枢神经系统肿瘤有多种免疫组化标记。本文以GFAP、S-100和波形蛋白为标记物，对276例星形细胞瘤进行免疫组化染色，染色结果与大多数文献一致。 GFAP是星形胶质细胞胞质中8 ~ 10 nm的中间丝，分子量为50kD。GFAP是胶质细胞的重要骨架成分，常出现在核周细胞和细胞质中。 1971年由英国人首次从多发性硬化患者的脑白质硬化斑块中分离出来。它是中间丝心蛋白家族的重要成员[3]。作为胶质纤维的特异性标记，它可用于确定颅内肿瘤中的胶质源性肿瘤。 FIKS [4]通过免疫组化分析证实GFAP与56例毛状星形细胞瘤和11例神经节细胞胶质瘤的预后显著相关。 改变GFAP基因及其表达状态对星形胶质细胞及其肿瘤的生物学特性有重要影响。 当小鼠的GFAP基因敲除后，GFAP阳性星形胶质细胞会表达巢蛋白(祖细胞标志物)，使细胞生长密度增加，提示GFAP表达缺失可使细胞呈现恶性表型，GFAP基因表达上调可促进胶质瘤分化，诱导肿瘤细胞凋亡[5] Lawrence [6]总结了GFAP在星形细胞瘤诊断中的价值，并强调在难以区分颅内原发性和转移性肿瘤时，GFAP阳性具有重要的参考意义。 本研究表明，在星形细胞瘤中，在肿瘤细胞的低分化区域，有丝分裂常见，细胞密度高，GFAP弱阳性或不染色，GFAP染色程度与细胞分化程度一致。 S-100蛋白主要集中在中枢神经系统的星形胶质细胞和相应的肿瘤细胞中。S-100蛋白分子由α亚基和β亚基组成，分子量为21000，生物半衰期为22h，因能100%溶于pH 7的饱和硫酸铵溶液而得名。 Wiesma [7]等人认为脑脊液中的S-100蛋白与年龄有关，随年龄增长而增加，可能与脑脊液的胶质细胞凋亡、脱髓鞘和代谢改变有关，但血浆中S-100蛋白的浓度与年龄、性别无确切关系。 目前，S-100蛋白单克隆抗体已用于检测临床标本，以鉴别肿瘤来源，提高胶质瘤诊断的准确性。 S-100蛋白分布广泛，特异性不强。目前主要用于中枢神经系统肿瘤的鉴别诊断。 Camby [8]]分析了95例星形细胞瘤中S-100蛋白的表达。结果表明，S-100蛋白的所有亚型在星形细胞瘤中均有表达，其表达与肿瘤的恶性程度呈负相关。本文的研究结果支持了这一观点。 波形蛋白是发育过程中所有细胞中最早的中间丝蛋白，但在成熟过程中被其他特定的中间丝蛋白取代。 在星形细胞瘤中，波形蛋白的分布与GFAP相似。 通常，波形蛋白的出现表明细胞仍处于不成熟阶段，细胞分化程度低[9] 一般来说，GFAP和波形蛋白在星形细胞瘤中共同表达，但波形蛋白作为标记物只出现在神经管成熟的某个阶段，而GFAP是星形细胞瘤的特异性标记物。 本研究结果表明，GFAP作为胶质细胞的特异性标记物，有助于星形细胞肿瘤的诊断、分级和恶性程度，S-100和波形蛋白可作为研究神经系统肿瘤的有用标记物。 GFAP、S-100和波形蛋白的表达与星形细胞瘤的病理分级有关。随着星形细胞瘤恶性程度的增加，GFAP、S-100的表达减少，而波形蛋白的表达增加。本研究结果与文献报道一致，提示这三种蛋白的表达可作为判断星形细胞瘤恶性程度的有意义指标。 在颅内肿瘤的临床治疗中，判断恶性程度是治疗的关键之一，对于一些组织学判断困难的肿瘤更为重要。 为了使颅内肿瘤尤其是胶质瘤的诊断和恶性评估更加准确，除了临床资料和he染色外，参考GFAP、S-100和波形蛋白的免疫组化染色结果也具有指导意义。