临床医学论文-胰岛素样生长因子2与血管瘤增殖关系的研究.doc

临床论文-胰岛素样生长因子2与血管瘤增殖关系的研究【关键词】血管瘤摘要:目的:探讨胰岛素样生长因子2 (IGF-2)与血管瘤增殖和变性的关系。 方法:采用免疫组织化学SP法检测40例血管瘤、15例血管畸形和5例正常皮肤中IGF-2和PCNA的表达。 结果:血管瘤组IGF-2和PCNA的表达高于血管畸形组和正常皮肤组(P 结论:IGF-2在调节血管瘤内皮细胞增殖中起重要作用。 关键词:血管瘤；胰岛素样生长因子2；增殖细胞核抗原；免疫组织化学血管瘤是婴儿最常见的良性肿瘤，少数也可见于成人。 Mulliken根据血管内皮细胞的特性及其生物学行为将新生儿的血管病变分为血管瘤和血管畸形，但临床上很难区分。血管瘤虽然是良性肿瘤，但早期确实有类似于恶性肿瘤的生长特点，晚期大多可以自行消退。 然而，血管瘤的发病机制仍不十分清楚。 胰岛素样生长因子-2 (IGF- 2)是一种具有强烈促进细胞有丝分裂和增殖活性的细胞因子，在哺乳动物的生长发育中起着重要作用。 最近的研究表明，IGF-2在血管生成中发挥作用，可能与血管瘤的增殖密切相关[1] 增殖细胞核抗原(PCNA)作为一种恶性肿瘤标志物，能很好地反映细胞的客观增殖功能。 为此，采用免疫组化技术研究了40例血管瘤、15例血管畸形和5例正常皮肤标本中IGF-2和增殖细胞核抗原PCNA的表达，并探讨了IGF-2与血管瘤增殖和变性的关系。 材料与方法1.1材料选取2001年至2004年在我院手术切除的皮肤血管瘤组织55例(男31例，女24例，年龄3个月至7岁)。 5例血管瘤周围正常皮肤组织作为对照。 制作三个4μm石蜡包埋标本连续切片，其中一个切片经HE染色进行再诊断和分型，另两个切片经IGF-2和PCNA蛋白检测。 1.2试剂即用型超敏感TM S-P免疫组化试剂盒、兔抗人IGF-2多克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体均购自福州迈信生物科技有限公司 1.3实验方法1.3.1常规HE染色根据Mulliken分类、临床表现和光镜下肿瘤结构将临床分类的血管瘤重新分为血管瘤和血管畸形，再根据Takahashi [2]将血管瘤分为增生期和变性期 1.3.2免疫组化染色及结果判定采用SP免疫组化法，严格按照试剂盒说明书、DAB染色、苏木精复染、镜检及分析结果进行。 空白换成PBS，其余步骤不变。 结果标准:IGF-2阳性细胞为胞浆内棕色颗粒。 PCNA阳性，细胞核内有棕黄色或棕褐色颗粒。 在此基础上，参考文献评分方法[3]，首先染色强度评分如下:1为弱阳性，2为中度阳性，3为强阳性；按阳性细胞百分比，0为阴性，1为阳性细胞≤25%，2为25% ~ 50%，3为51% ~ 75%，4为> 75%。 将染色强度加到阳性细胞的分数上，0 ~ 3分为负(-)分，4 ~ 7分为正(+)。 1.4统计处理采用χ 2检验、Fishers精确概率法和Spearman非参数相关分析，均用SPSS11.5软件处理。 P 结果2.1皮肤血管瘤的组织学分类根据Mulliken分类，55例手术标本可分为血管瘤40例，其中增生期28例，退行期12例。血管畸形15例 2.2 IGF-2和PCNA蛋白的表达及其相互关系结果见表1。5例正常皮肤组织中IGF-2和PCNA蛋白均为阴性，而血管瘤组阳性率为67。50%和62。50%，高于血管畸形组，差异非常显著(P 血管瘤增生期IGF-2和PCNA蛋白的阳性率高于退行期，差异非常显著(P 在血管瘤中，IGF-2阳性22例，PCNA阴性11例，呈显著正相关(P=0.000，r =0.632)。 表1 IGF-2和PCNA在不同血管疾病中的蛋白表达3讨论胰岛素样生长因子(IGF)是一个重要的生长因子家族，包括IGF-1、IGF-2、相应的受体和结合蛋白。 IGF-2基因位于人类染色体11p15上，IGF-2基因编码的IGF-2蛋白是一种单链弱酸性多肽，有67个氨基酸，分子量为7144KD。 IGF-2是一种强促有丝分裂剂，在体内和体外都具有很强的促进细胞增殖和分化的能力[4] 但研究发现，人类胎儿IGF-2的含量远高于成人，出生后IGF-2的表达仅限于少数组织(如肝脏、神经组织等。)[5]，这说明IGF-2在调节组织和细胞的生长发育中起着重要的作用。 最近的研究表明，IGF-2的过度表达与恶性肿瘤(如结肠癌、卵巢癌等)密切相关。)和其他增生性疾病[6，7] 实验结果表明，增生期血管瘤血管内皮细胞中IGF-2蛋白的阳性表达率与消退期血管瘤、血管畸形和正常皮肤的血管内皮细胞有显著差异(P 这些结果表明，IGF-2在血管瘤血管内皮细胞的增殖中起重要作用，可以像PCNA一样作为血管瘤的标志抗原。 PCNA是DNA聚合酶δ的辅助蛋白，含有216个氨基酸，相对分子量为36。 PCNA是一种细胞周期调节蛋白，在G1晚期开始增加，在S期达到高峰，在DNA复制前的G2期开始减少，因此可以作为细胞增殖的指标。 实验结果表明，PCNA蛋白在血管瘤中的阳性率明显高于血管畸形和正常皮肤，在增生期血管瘤中的阳性率明显高于消退期，与文献[8]报道的结果一致 证明血管内皮细胞过度增殖是血管瘤的重要组织病理学特征，PCNA可作为鉴别血管瘤与血管畸形、观察血管瘤发展演变的重要指标。 1 Ritter MR，Dorrell MI，Edmonds J，等.通过大规模表达分析鉴定胰岛素样生长因子和血管瘤生长和消退的潜在调节因子.美国国家科学院学报，2002，99 (11):7455~7460。2 Takahashi K，Mulliken JB，Kozakewich HP，等.区分婴儿期和儿童期血管瘤分期的细胞标记物.临床投资杂志，1994，93(6):2357~2364。3托曼宁-纳潘坎加斯U，SoiniY，Kahlos K，等. caspases-3，-6和-8在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系. carcinoma.Int肿瘤杂志，2001，93(2): 192~198 .4伯杰公司。胰岛素样生长因子与认知功能。英国医学杂志，2001年，322(1):203~208。5 Kawamoto K，Onodera H，Kan S，等.胰岛素样生长因子-2在结直肠癌肝转移中的可能旁分泌机制.癌症，1999，85(1):18~25。6科恩普拉特P，雷哈克P，鲁肖夫J，等。胆囊癌组织中IGFⅰ型、IGF-II和IGFⅰ型受体的表达。包括原发性和相应转移性肿瘤的系统分析。临床病理学杂志，2006，59 (2):202~206。7卢L，Katsaros D，Wiley A，等。上皮性卵巢癌中胰岛素样生长因子-ⅱ，胰岛素样生长因子结合蛋白-3，雌激素受体-α表达与疾病进展的关系。临床扫描研究，2006，12 (4): 1208 ~ 1214.8程立新，唐，罗，等.增殖细胞核抗原在血管瘤中的表达及其临床意义.中国医学美容杂志，2001，7 (2): 77 ~ 78。